DBCO-NH-PEG4-NH-Mal是一种双功能交联剂,其分子结构包含应变炔环结构的DBCO、柔性PEG₄连接链及末端Maleimide反应基团,通过两个氨基连接点(–NH–)实现结构稳定与可调性,可在温和条件下定向偶联两种生物分子,广泛应用于生物医学研究领域。
该交联剂的核心结构由三个关键单元构成:DBCO(Dibenzocyclooctyne)提供应变炔环反应位点,PEG₄(四单元乙二醇)连接链赋予分子良好柔性与水溶性,Maleimide(马来酰亚胺)基团作为巯基反应末端。中间的–NH–连接点增强了分子的结构稳定性与环境适应性,PEG₄链则提升了在水溶性体系中的分散性与空间延展性。
分子具备两种高度特异性的反应特性:DBCO基团可与叠氮(–N₃)通过应变促进无铜点击反应(SPAAC)形成稳定三唑环,无需金属催化;Maleimide基团在中性至微碱性(pH 6.5–7.5)条件下,通过Michael加成反应与巯基(–SH)共价结合生成硫醚键。双反应位点设计允许在温和条件下实现两种生物分子的定向偶联,尤其适用于蛋白、肽及细胞表面等敏感体系的修饰。
该交联剂主要应用于抗体-药物偶联(ADC)、多肽与蛋白交联、荧光探针标记、纳米载体表面功能化、聚合物修饰及生物传感器构建等领域。其双功能特性支持在同一分子上连接不同功能模块,例如通过Maleimide端偶联含巯基蛋白质,DBCO端连接叠氮化药物或荧光分子,从而构建双功能生物偶联体系。
使用时,该交联剂可溶于DMSO、DMF等有机溶剂,或在含5–10%有机助溶剂的PBS缓冲液中进行反应。Maleimide基团易水解,需现配现用并避免长时间暴露于湿气;反应可在室温下进行,产物生成后稳定性良好。建议储存于–20°C避光密封环境,以防潮解与氧化。